人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

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• 论文作者：许云云 ; 李芳 ; 梁含思 ; 甄允方 ; 汪健 ; 张学光
• 年：2016
• 作者机构：苏州大学附属儿童医院儿科研究所;苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室;苏州大学附属第一医院临床免疫研究所;苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心;
• 论文关键词：多指 ; pBMSCs ; 软骨细胞 ; 分化 ; Sox9/BMP信号通路
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R68
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：1
• 文件大小：1165k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

目的:自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的重点。本课题组前期研究发现,一种特殊来源的BMSCS——人多指来源的BMSCs更倾向于向软骨细胞的诱导分化。本研究旨在研究人多指来源BMSCs(BMSCs from polydactyly,pBMSCs)的生物学特性,进而阐明其倾向于向软骨细胞分化的作用及机制。方法:从苏州大学附属儿童医院获取幼儿多指(经患者家属同意),收集骨髓细胞进行贴壁培养,获得pBMSCs细胞。随后通过PT-PCR、流式细胞仪检测MSCs细胞的特异性标志;绘制生长曲线观察pBMSCs细胞的增殖能力;分化实验证明pBMSCs细胞向脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞的诱导分化能力;Real-time PCR和Western Blot分析Sox9/BMP信号在调控软骨细胞形成中的作用;共培养实验观察pBMSCs对软骨细胞体外生长的作用。结果:pBMSCs细胞高表达间充质细胞表面标志CD73、CD90、CD105和CD166,不表达造血细胞表面标志CD34、CD45、CD133和HLA-DR。较之于BMSCs,pBMSCs具有更强的体外增殖能力;进而发现,pBMSCs向脂肪和骨诱导分化的能力较弱,但pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,其诱导成软骨细胞的时间为7d,而BMSCs诱导成软骨细胞所需时间为14d。机制实验初步证实pBMSCs中BMP4的表达显著高于BMSCs,而且Sox9的表达也高于BMSCs,随后我们又在蛋白水平上观察到同样的情况:pBMSCs中Sox9和BMP4的蛋白水平明显高于BMSCs。最后,将pBMSCs与软骨细胞共培养后,发现其对软骨细胞的生长具有支持作用。结论:本研究发现pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,Sox9/BMP通路介导了pBMSCs向软骨细胞的分化,且pBMSCs可支持软骨细胞的生长。为此,pBMSCs有望成为膝关节置换的种子细胞。

引文