对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备

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• 出版年：2008
• 作者：彭小莉；刘棠；徐维佳；王群力；陈伟玲；陈双雅；王景明；谢明星
• 单位1：厦门出入境检验检疫局
• 出生年：1980
• 学历：硕士
• 职称：助理工程师
• 语种：中文
• 作者关键词：传染性皮下及造血组织坏死病毒；衣壳蛋白；基因克隆及表达；蛋白质纯化；Western免疫印迹；对虾
• 起始页：37
• 总页数：6
• 经费资助：2006年国家质检总局科技基金资助项目(20061K015)资助
• 刊名：台湾海峡
• 是否内版：否
• 刊频：季刊
• 创刊时间：1982
• 主管单位：国家海洋局
• 主办单位：国家海洋局第三海洋研究院；福建省海洋学会
• 主编：余兴光
• 地址：福建省厦门市大学路178号
• 邮编：361005
• 电子信箱：twhxbjb@yahoo.com.cn
• 卷：27
• 期：1
• 期刊索取号：P226.06 792
• 核心期刊：全国中支核心期刊 ；中国科技核心期刊 ；中国百然科学核心期刊

摘要

本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列（NC-002190），设计出主要结构蛋白基因的相应引物，从厦门发病的对虾中，提取DNA，以此为模板，利用PCR扩增目的基因。再将目的基因分别与pGEX-6pl载体和pET-28a载体连接，构建重组表达载体pGEX-Ⅳ、pET-IV，重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌Bl21，IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测，大小约为62KDa和41KDa，与预测大小一致，将pET-IV表达重组蛋白经纯化，免疫小鼠，Western免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-IV和pET-IV表达的蛋白发生特异性反应。本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础。