花脸蘑菌丝生物学特性及其胞外酶活性的研究
|
摘要
花脸蘑[Lepista sordida (Fr.)Sing]为伞菌目(Agaricales)，口蘑科(Tricholomatceae)，香蘑属(Lepista)的一种野生腐生菌。在我国，野生花脸蘑广泛的分布在云南、四川、新疆、西藏、贵州和福建等地区，但花脸蘑在野生状态下，数量少，产量低，十分珍贵。其色泽美丽，气味浓香，味道鲜美，营养价值和医疗价值极高，是珍稀优质的野生食用菌。目前对花脸蘑的研究甚少，仅对其野生资源进行了调查，初步研究了花脸蘑的生物学习性以及驯化栽培，但关于花脸蘑生物降解的研究以及大规模人工栽培的报道尚未发现。
本论文从应用基础出发，对花脸蘑形态特征和生活史初次进行了较为系统的研究以及对菌丝体生长的营养和环境条件做了详细的试验，较系统的了解花脸蘑的生物学特性；从研究不同培养基和不同生长阶段的花脸蘑胞外酶活性入手，了解花脸蘑对不同培养基质的降解能力和不同生长阶段对培养枓的需求。以期为进一步研究花脸蘑的生理生化奠定理论基础和开发驯化花脸蘑提供科学依据。本试验做了如下研究：
花脸蘑菌丝生物学特性的研究
试验1 花脸蘑形态特征和生活史的研究
从分类学角度来说所有食用菌的宏观特征都是对它们自身进行分类鉴定的重要依据之一，通过对花脸蘑子实体、孢子印、孢子和菌丝体的观察详尽了解花脸蘑的形态特征以确立花脸蘑在植物学的分类地位，并通过借鉴同科的其它食用菌生活史以模拟花脸蘑生活史。
试验2 花脸蘑菌丝生长特性的研究
本试验通过采用固体培养对花脸蘑母种培养基进行筛选，从供试的五种培养基中选出最适培养基为综合PDA培养基，其次为小麦培养基。采用固体平板法对花脸蘑菌丝生长各个因
-一-一一一-.—甲，居迪契牡犁玛拿处泌一—--一
子进行优化，结果表明:花脸蘑菌丝生一长有很宽的碳源谱，生一长最适碳源为蔗糖，其次为淀
粉:最适氮源为有机氮，酵母膏优于蛋白陈，无机氮源中硝态氮和铰态氮之间也有显著差异;
菌丝生长适宜温度为25℃、pH值为6.5、碳氮比为20:l一60:1。并根据单因子试验采用正交
试验设计对碳源、氮源、PH值进行了正交试验，结果表明碳源为蔗糖、氮源为酵母、PH值为
7的组合菌丝生长最好。液体摇瓶培养当碳源为蔗糖时生物量最高，蔗糖浓度以5%时生物量
最高，菌丝球的人小与糖类物质的利用率无必然联系。正交试验表明以碳源为蔗糖、氮源为
蛋自陈、pH值为7的组合生物量最高。
花脸蘑菌丝胞外酶活性的研究
试验3不同碳源处理对花脸蘑菌丝胞外酶活性的影响
采用液体摇瓶试验测得花脸蘑菌丝生长时可以产生多种胞外酶:淀粉酶、纤维素酶、半
纤维素酶、漆酶、过氧化物酶、愈创木酚酶，它们的酶活性不但和菌丝生物量有联系，还与
反应底物(不同碳源)有关;反应底物(蔗糖)一致时，随着蔗糖浓度升高，各种酶活性升
高，当蔗糖浓度为2%时各种酶活不再增加，但保持在较高水平，花脸蘑胞外酶活性对碳源蔗
糖的饱和浓度为2%。
试验4不同培养基对花脸蘑栽培种胞外酶活性的影响
本试验对六种培养基上的花脸蘑八种胞外酶:梭甲基纤维素酶、微晶纤维素酶、半纤维
素酶、淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶、愈创木酚酶和过氧化物酶活性进行测试，结果表明酶活
性的动态变化与培养基的成分有必然的联系。同一酶系中菌丝所处的营养环境对酶活性大小
的影响造成差异，并不影响酶活性的变化趋势。不同培养基对各种酶活性大小影响程度没有
一致性，这可能是六种培养基中各种酶作用的底物含量不同的原因。花脸蘑栽培种供试培养
基中，以粪草培养基菌丝生长速度最快，生长势好，菌丝颜色为淡紫色。从这六种培养基菌
丝生长看花脸蘑为好气性真菌，当碳源为淀粉、“卜纤维素、纤维素时较易利用，对木质素的
分解利用能力较差。
试验5花脸蘑栽培过程中酶活性的变化
本试验从栽培种定植起到出现菇蕾结束，每隔五大取样，测其梭甲基纤维素酶、一1’=纤维
素酶、淀粉酶、漆酌、多酚氧化酶、愈创木酚酶和过氧化物酶活性。试验结果表明:在花脸
蘑栽培过程中，淀粉酶在菌丝生长初期阶段活性较高，当菌丝生长进入生理活跃期时，纤维素
和、}几纤维素酶活性升高，说明这两种酶在花脸蘑营养生长阶段对碳源的提供起重要作用。当
出现菌丝扭结，花脸蘑即将进入生殖期，纤维素和平纤维酶活达到一个高峰期，与木质素降
解有关的四种酶:漆酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和愈创木酚酶的活性也快速升高。
Lepista sordida, which belongs to Agaricales, Tricholomatceae and Lepista, is one kind of the wild saprophytic fungus. In our country, the wild Lepista sordida is extensively distributed in the areas, such as Yunnan, Sichuan, Xinjiang, Tibet, Guizhou and Fujian, etc., but the output is extremely low, so it is very precious. Lepista sordida has beautiful color and luster, its smell is thick fragrant, its taste is delicious, its nutritive value and medical value are extremely high, it is a kind of rare and high-quality wild edible fungus. There is very few study on Lepista sordida at present, only some surveys about the wild resource, the preliminary research on the biological habit and tame culture of Lepista sordida has been done, but the research on Lepista sordida biodegradation and report of extensive artificial culture have not been found yet.
From the viewpoint of application foundation, this thesis carries on comparatively systematic research on the life history of Lepista sordida for the first time, makes detailed experiments upon nutrition and environmental conditions that mycelium grows, so as to understand the biological characteristic of Lepista sordida detailedly and systemically. Start from studying the influence of different substrate and different stages of growing on extracellular enzymes activity of Lepista sordida, understanding the demand for the biodegradation ability of different substrates and the demand for substrates of different stages of growing, so as to establish the theoretical foundation of physiological biochemistry for studying Lepista sordida, and offer scientific basis to develop and tame Lepista sordida. This thesis has done the following researches:
Research on the biological characteristic of Lepista sordida mycelium
Experiment 1 Research on the form characteristic and life history of Lepista sordida
From the viewpoint of taxonomy, all macroscopical characteristics of the edible fungus are one of the important bases to classify and determine themselves. The research idea is following, through
the observation on fruit body, spore print, spore and mycelium of Lepista sordida, in order to understand the form characteristic of Lepista sordida exhaustivly, and establish the classification status of Lepista sordida in botany. Besides, by referring to the life history of other edible fungus, so as to simulate the life history of Lepista sordida.
Experiment 2 Research on the hypha growing characteristic of Lepista sordida
This experiment adopts solid-state substrates to select the mother substrates of Lepista sordida. The comprehensive PDA substrate is most appropriate substrates, and second is the wheat substrates. The solid-state substrates is adopted to optimize the different growth factor of Lepista sordida, the results are following. The hypha of Lepista sordida has very wide carbon sources to grow, and the cane sugar is the best carbon source for growth, secondly it is the starch. The most appropriate nitrogen source is the organic nitrogen, and yeast lotion is better than albumen peptone. Besides, during the inorganic nitrogen sources, there is a remarkable difference between the nitrate nitrogen and ammonium nitrogen too. The suitable temperature for hypha growing is 25centigrade degree, pH value is 6.5, and the ratio of carbon and nitrogen is from 20:1 to 60:1. The orthogonal experimental design method to carbon source, nitrogen source and pH value is adopted according to single factor. The results indicate that the best combination for hypha growing is the cane sugar as carbon source, yeast as nitrogen source, and pH value is 7. As for the submerged culture with shake flask, carbon source has the most amount of biomass when cultivation, and it has the most mount of biomass when cane sugar density is 5%. The size of hypha ball and the utilization ratio of the candy material do not have positive connection. The orthogonal experimental shows, the combination of the cane sugar as carbon source, albumen peptone as nitrogen source, and pH value be equal to 7 has the
本论文从应用基础出发，对花脸蘑形态特征和生活史初次进行了较为系统的研究以及对菌丝体生长的营养和环境条件做了详细的试验，较系统的了解花脸蘑的生物学特性；从研究不同培养基和不同生长阶段的花脸蘑胞外酶活性入手，了解花脸蘑对不同培养基质的降解能力和不同生长阶段对培养枓的需求。以期为进一步研究花脸蘑的生理生化奠定理论基础和开发驯化花脸蘑提供科学依据。本试验做了如下研究：
花脸蘑菌丝生物学特性的研究
试验1 花脸蘑形态特征和生活史的研究
从分类学角度来说所有食用菌的宏观特征都是对它们自身进行分类鉴定的重要依据之一，通过对花脸蘑子实体、孢子印、孢子和菌丝体的观察详尽了解花脸蘑的形态特征以确立花脸蘑在植物学的分类地位，并通过借鉴同科的其它食用菌生活史以模拟花脸蘑生活史。
试验2 花脸蘑菌丝生长特性的研究
本试验通过采用固体培养对花脸蘑母种培养基进行筛选，从供试的五种培养基中选出最适培养基为综合PDA培养基，其次为小麦培养基。采用固体平板法对花脸蘑菌丝生长各个因
-一-一一一-.—甲，居迪契牡犁玛拿处泌一—--一
子进行优化，结果表明:花脸蘑菌丝生一长有很宽的碳源谱，生一长最适碳源为蔗糖，其次为淀
粉:最适氮源为有机氮，酵母膏优于蛋白陈，无机氮源中硝态氮和铰态氮之间也有显著差异;
菌丝生长适宜温度为25℃、pH值为6.5、碳氮比为20:l一60:1。并根据单因子试验采用正交
试验设计对碳源、氮源、PH值进行了正交试验，结果表明碳源为蔗糖、氮源为酵母、PH值为
7的组合菌丝生长最好。液体摇瓶培养当碳源为蔗糖时生物量最高，蔗糖浓度以5%时生物量
最高，菌丝球的人小与糖类物质的利用率无必然联系。正交试验表明以碳源为蔗糖、氮源为
蛋自陈、pH值为7的组合生物量最高。
花脸蘑菌丝胞外酶活性的研究
试验3不同碳源处理对花脸蘑菌丝胞外酶活性的影响
采用液体摇瓶试验测得花脸蘑菌丝生长时可以产生多种胞外酶:淀粉酶、纤维素酶、半
纤维素酶、漆酶、过氧化物酶、愈创木酚酶，它们的酶活性不但和菌丝生物量有联系，还与
反应底物(不同碳源)有关;反应底物(蔗糖)一致时，随着蔗糖浓度升高，各种酶活性升
高，当蔗糖浓度为2%时各种酶活不再增加，但保持在较高水平，花脸蘑胞外酶活性对碳源蔗
糖的饱和浓度为2%。
试验4不同培养基对花脸蘑栽培种胞外酶活性的影响
本试验对六种培养基上的花脸蘑八种胞外酶:梭甲基纤维素酶、微晶纤维素酶、半纤维
素酶、淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶、愈创木酚酶和过氧化物酶活性进行测试，结果表明酶活
性的动态变化与培养基的成分有必然的联系。同一酶系中菌丝所处的营养环境对酶活性大小
的影响造成差异，并不影响酶活性的变化趋势。不同培养基对各种酶活性大小影响程度没有
一致性，这可能是六种培养基中各种酶作用的底物含量不同的原因。花脸蘑栽培种供试培养
基中，以粪草培养基菌丝生长速度最快，生长势好，菌丝颜色为淡紫色。从这六种培养基菌
丝生长看花脸蘑为好气性真菌，当碳源为淀粉、“卜纤维素、纤维素时较易利用，对木质素的
分解利用能力较差。
试验5花脸蘑栽培过程中酶活性的变化
本试验从栽培种定植起到出现菇蕾结束，每隔五大取样，测其梭甲基纤维素酶、一1’=纤维
素酶、淀粉酶、漆酌、多酚氧化酶、愈创木酚酶和过氧化物酶活性。试验结果表明:在花脸
蘑栽培过程中，淀粉酶在菌丝生长初期阶段活性较高，当菌丝生长进入生理活跃期时，纤维素
和、}几纤维素酶活性升高，说明这两种酶在花脸蘑营养生长阶段对碳源的提供起重要作用。当
出现菌丝扭结，花脸蘑即将进入生殖期，纤维素和平纤维酶活达到一个高峰期，与木质素降
解有关的四种酶:漆酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和愈创木酚酶的活性也快速升高。
Lepista sordida, which belongs to Agaricales, Tricholomatceae and Lepista, is one kind of the wild saprophytic fungus. In our country, the wild Lepista sordida is extensively distributed in the areas, such as Yunnan, Sichuan, Xinjiang, Tibet, Guizhou and Fujian, etc., but the output is extremely low, so it is very precious. Lepista sordida has beautiful color and luster, its smell is thick fragrant, its taste is delicious, its nutritive value and medical value are extremely high, it is a kind of rare and high-quality wild edible fungus. There is very few study on Lepista sordida at present, only some surveys about the wild resource, the preliminary research on the biological habit and tame culture of Lepista sordida has been done, but the research on Lepista sordida biodegradation and report of extensive artificial culture have not been found yet.
From the viewpoint of application foundation, this thesis carries on comparatively systematic research on the life history of Lepista sordida for the first time, makes detailed experiments upon nutrition and environmental conditions that mycelium grows, so as to understand the biological characteristic of Lepista sordida detailedly and systemically. Start from studying the influence of different substrate and different stages of growing on extracellular enzymes activity of Lepista sordida, understanding the demand for the biodegradation ability of different substrates and the demand for substrates of different stages of growing, so as to establish the theoretical foundation of physiological biochemistry for studying Lepista sordida, and offer scientific basis to develop and tame Lepista sordida. This thesis has done the following researches:
Research on the biological characteristic of Lepista sordida mycelium
Experiment 1 Research on the form characteristic and life history of Lepista sordida
From the viewpoint of taxonomy, all macroscopical characteristics of the edible fungus are one of the important bases to classify and determine themselves. The research idea is following, through
the observation on fruit body, spore print, spore and mycelium of Lepista sordida, in order to understand the form characteristic of Lepista sordida exhaustivly, and establish the classification status of Lepista sordida in botany. Besides, by referring to the life history of other edible fungus, so as to simulate the life history of Lepista sordida.
Experiment 2 Research on the hypha growing characteristic of Lepista sordida
This experiment adopts solid-state substrates to select the mother substrates of Lepista sordida. The comprehensive PDA substrate is most appropriate substrates, and second is the wheat substrates. The solid-state substrates is adopted to optimize the different growth factor of Lepista sordida, the results are following. The hypha of Lepista sordida has very wide carbon sources to grow, and the cane sugar is the best carbon source for growth, secondly it is the starch. The most appropriate nitrogen source is the organic nitrogen, and yeast lotion is better than albumen peptone. Besides, during the inorganic nitrogen sources, there is a remarkable difference between the nitrate nitrogen and ammonium nitrogen too. The suitable temperature for hypha growing is 25centigrade degree, pH value is 6.5, and the ratio of carbon and nitrogen is from 20:1 to 60:1. The orthogonal experimental design method to carbon source, nitrogen source and pH value is adopted according to single factor. The results indicate that the best combination for hypha growing is the cane sugar as carbon source, yeast as nitrogen source, and pH value is 7. As for the submerged culture with shake flask, carbon source has the most amount of biomass when cultivation, and it has the most mount of biomass when cane sugar density is 5%. The size of hypha ball and the utilization ratio of the candy material do not have positive connection. The orthogonal experimental shows, the combination of the cane sugar as carbon source, albumen peptone as nitrogen source, and pH value be equal to 7 has the
引文
[1]暴增海，张功．食川菌栽培学．吉林：吉林出版社，2002，1～5
[2]张树庭，P．G Miles．食用蕈菌及其栽培．保定：河北大学出版社，1992，3～11
[3]徐天惠，刘强．食用菌概论．北京：中国农业出版社，1987，1～3
[4]张松．食用菌学．广州：华南理工大学出版社，1999，6～9
[5]邢来君，李明春．普通真菌学．北京：高等教育出版社，1999，2～3
[6]郑林刚，谭伟，彭卫红等．中国食用菌产业现状和发展策略．西南农业学报，2003，16(3)：55～58
[7]陈艳秋，曹丽， 王兴国．中国食用菌产业的现状与发展方向．延边大学农学学报，2002，24(3)：34～35
[8]韩联生，颜素珍．中国食用菌产业发展的现状与应采取的对策．中国林副特产，1995，34(3)：31～35
[9]黄毅．食用菌栽培．北京：高等教育出版社，1998，12
[10]谢宝贵，吕做舟，江玉姬．食用菌储藏与加工实用技术．北京：农业出版社，1994，14～15
[11]苟中兰．食用菌的营养价值及医疗保健功能．川东学刊，1995，5(2)：104～107
[13]王素媛．食用菌的代谢产物．生物学教学，2001，26(9)：35～38
[14]吕岱人．食用菌与人类生态环境．青岛建筑工程学院学报，1994，15(1)：23～30
[15]冯帆，屈飞．真菌的分类、价值与利用．陕两师范大学继续教育学报，2003，20(3)：117～119
[16]彭克俭．食用菌的种质保存．中国食用菌，2000，21(3)：7～10
[17]戴芳澜．中国真菌总汇．北京：科学出版社，1979，23～26
[18]刘日新．食用菌的研究与利用．中国食刚菌，1999，17(4)：5～8
[19]上海农业科学院食用菌研究所．中国食用菌志．北京：中国林业出版社，1991，116～117
[20]李志超，杨珊珊．食药用菌生产与消费指南．北京：中国农业出版社，1997，6～14
[21]娄隆后，朱慧真，周璧华．食用菌生物学及栽培技术．北京：中国林业出版社，1984，11
[22]杨庆尧．食用菌生物学基础．上海：上海科技出版社，1981，6～14
[23]裘娟萍，孙培龙，朱家荣等．灰树花深层发酵培养基的研究．微生物学通报，2000，27(4)：275～278
[24]谭伟．长根金钱菌生物学特性研究．食用菌学报，2001，8(3)：16～22
[25]阎培生，李桂舫，蒋家慧等．大球盖菇菌丝生长的营养需求及环境条件．食用菌学报，2001，8(1)：5～9
[26]杨新美．中国菌物学传承与开拓．北京：中国农业出版社，2001，9
[27]郭倩，何庆邦．四孢蘑菇生长过程中四种孢外酶活性和木质素降解的变化规律．食用菌学报，1998，5(2)：13～17
[28]肖光辉．香菇大分子碳源代谢的研究．食用菌学报，1994，1(1)：31～35
[29]潘迎捷，倪新江，李人圭．香菇生长过程中木质素纤维素的生物降解规律．食用菌学报，1995，2(2)：18～22
[30]严培兰，高君辉，谭琦等．黑木耳的抗霉能力、产量性状与不同胞外酶活的相关性．用菌学报，1999,6(1)：5～8
[31]肖光辉．香菇大分子碳源代谢的研究．食用菌学报，1994，1(1)：31～35
[32]杨新美．中国食用菌栽培学．北京：农业出版社．1988，1～5，530～532
[33]黄年来．中国食用菌百科．北京：中国农业出版社．1993，125～210
[34]张光亚．云南食用菌．昆明：云南人民出版社．19884，476～478
[35]MazurX. BeckerU' AnkeT. et al. Two new bioactive diterpenes from Lepista sordida Phytochemistry . 1996, 43(2): 40～407
[36]罗新毅，洪江，张勇民．花脸香蘑氨基酸研究．氨基酸和生物资源，2003，25(3)：14～15
[37]罗新毅，洪江，张勇民．花脸香蘑元素测定．中国食用菌，2003，22(4)：43～48
[38]卯晓岚．中国经济真菌．北京：科学出版社，1998，223～225
[39]Casteel D. A. Peroxy natural products. Prod Rep, 1999, 16:55～73
[40]高锦明，杨雪，刘吉开等．紫丁香蘑的化学成分．中草药，2002，33(5)：398～402
[41]倪新江，冯志勇，梁丽琨等．鸡腿菇对棉籽壳的降解与转化．微生物学通报，2002，29(2)：1～4
[42]牛福文，印桂玲，刘宝增．黑木耳栽培两种培养基主要组分的降解和有关酶活的变化．微生物学通报，1990，17(4)：
[43]田果廷，杨琼芳，徐学忠．紫花脸香蘑驯化栽培研究．食用菌学报，2003，10(1)：52～56
[44]卢成英，李鹄鸣，钟以举．紫晶香蘑生物学研究．生态学杂志，1994，13(4)：37～41
[45]江枝和，朱丹，杨佩玉．姬松茸生物学特性研究．食用菌学报，1996，3(3)：5～12
[46]杜巍，李元瑞，袁静等．灰树花液体深层培养条件的研究．西北农林科技大学学报，2002，30(1)：21～24
[47]王宜磊．侧耳液体培养特性及胞外酶活性研究．中国食用菌，2000，19(4)：33～35
[48]潘迎捷，陈明杰．香菇生长发育过程中酶活性的变化．上海农业学报，1991，7(2)：21～26
[49]李合生．植物生理生化试验原理和技术．北京：高等教育出版社，2000，184～185
[50]谢君，任路，张义止．侧耳菌产生小质纤维素酶及其降解植物生物质的研究．兰州大学学报，2002，38(2)：121～125
[51]倪新江，丁立孝，潘迎捷等．姬松茸在两种培养基上生长期间九种胞外酶活性变化．菌物
系统，2001， 20(2)：222～227
[52]杨新关．食用菌研究法．北京：中国农业出版社，1998，176～180
[53]李合生．植物生理生化试验原理与方法．北京：中国轻工业出版社，2000，29～32
[54]佟晓华，张强，洛淑华．二株霉菌的术聚糖酶活性测定．农业与技术，1997，11(6)：29～33
[55]王宜磊，邓振旭，朱陶等．彩绒革盖菌CV-8漆酶活性的初步研究．微生物学杂志，1998，18(4)：61～65
[56]王宜磊，赵良田．彩绒革盖菌多酚氧化酶活性研究．微生物学通报，1999，16(4)：454～456
[57]张凤琴．不同糖类对鸡腿蘑胞外酶活性及多糖分泌的影响．食用菌，1999，21(4)：5～6
[58]杨安贵．农业试验设计基础及统计分析重庆：重庆大学出版社，1994，88～102
[59]肖玉珍，赵静珍．花脸蘑(Lepista Sordida)人工驯化栽培技术的研究．东北农业大学学报，1995，26(1)：7～12
[60]饶军，饶文龙．花脸香蘑菌种培养基筛选．中国食用菌，2000，19(2)：9
[61]黄新汉．几种食用菌菌丝对不同碳氮源的利用．食用菌，1990，12(3)：10～11
[62]向世华．食用真菌的营养生理．中国食用菌，1990，9(5)：13～14
[63]申慧彦，刘朝贵．花脸蘑菌丝营养特性的研究．食用菌，2003，(3)：5
[64]江枝和，李三暑，郑永标等．虎奶菇生物学特性研究．食用菌学报，2000，7(4)：11～17
[65]卢成英．紫晶香蘑生物学特性及栽培研究初报．吉首大学学报，1994，15(4)：82～88
[66]陈士瑜．菇菌生产技术全书．北京：中国农业出版社，1999，28
[67]龚建华，苏华．药用蕈菌姬松茸液体培养的菌丝形态学特征．应用与环境生物学报，2001，7(6)：593～599
[68]谢君，任路，张义正．侧耳产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究．兰州大学学报，2002，38(2)：121～128
[69]Higuchi .T.H. Biodegradation of lignin: biochemistry and potential application. Expertia, 1982, 38: 159～166
[70]李亮亮，牛森．纤维素酶活力测定方法的比较研究．辽宁农业科学，2001(4)，16～18
[71]曾荣鉴．碳源和氮源对平菇菌丝胞外酶的诱导作用．食用菌，1992，14(1)：17～18
[72]王佳玲，余惠生，付时雨．白腐菌漆酶的研究进展．微生物学通报，1998，25(4)：233～235
[73]Wood. D. A. Inactivation of extracelluar laccse of Agaricus bisporrus during fruiting. J. Gen. Microbiol. 1980, 117: 339～345
[74]Johne E. The filamentous fungi. Fungal technology, 1983(4): 265
[75]Shamala T. R. Screekantian K. R. Production of cellulase and D-xylanase by some selected fungal isolases. Enzyme microb. Technol, 1986, 8(3): 178～182
[76]林亲雄，陈京元．碳源和氮源对松乳菇菌丝生长的影响．食用菌学报，2002，9(1)：44～46
[77]A. K. Saka, N. Damajpati. Effect of carbon sources on the growth and protein production of Collybia diminuta, Tricholoma lobayense and Oudemansiella canarii in submerged culture. Mush. J. for the tropics. 1990, 10(3): 69～73
[78]潘继红，曹霞，李峰等．灵芝液体培养营养需求的探讨．食用菌学报，1997，4(1)：31～34
[79]陈惠群，刘洪玉，李子平．中国块菌主要生理特性初步研究．食用菌学报，1998，5(4)：26～30
[80]党建章，何宗智，江保国等．茶薪菇菌丝液体培养的营养需求．微生物学杂志，1999，19(2)：11～13
[81]郑福琴，杨瑞长，刘日心．蘑菇培养料的碳氮比与养分和产量的关系．上海农业学报，1995，11(1)：33～38
[82]钟雪美，屈亮．麦草培养料碳氮比值对平菇生长发育和产量的影响．中国食用菌，1988，11(1)：17～19
[83]王秉峰，李玉珍．深层培养紫孢侧耳菌丝体的研究．食用菌学报，1995，2(3)：11～17
[84]王宜磊．碳源和氮源对彩绒革盖菌小质纤维素和木质素酶分泌的影响．微生物学杂志，2000，20(1)：29～31
[85]郭杰炎，蔡武城．微生物酶．北京：科学出版社，1986，30～62
[86]Alan Fersht．酶的结构利作用机制．北京：北京大学出版社，1991，283～29
[87]尉晓宇．食用菌酶学的应用研究．中国食用菌，1990，9(5)：15～16
[88]wood D. Substrate bioconversion by Agaricus bisporus. The proceeding of 98 nanjing International Symposium onscience and cultivation of mushrooms. 1998, 17～23
[89]王玉万，王云．构菌栽培过程中对木质纤维素的降解和几种多糖分解酶活性的变化．微生物通报，1989，16(3)：137～140
[90]潘迎捷，陈明杰，郑海歌等．香菇和平菇生长发育中漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性的变化．上海农业学报，1991，7(2)：21～26
[2]张树庭，P．G Miles．食用蕈菌及其栽培．保定：河北大学出版社，1992，3～11
[3]徐天惠，刘强．食用菌概论．北京：中国农业出版社，1987，1～3
[4]张松．食用菌学．广州：华南理工大学出版社，1999，6～9
[5]邢来君，李明春．普通真菌学．北京：高等教育出版社，1999，2～3
[6]郑林刚，谭伟，彭卫红等．中国食用菌产业现状和发展策略．西南农业学报，2003，16(3)：55～58
[7]陈艳秋，曹丽， 王兴国．中国食用菌产业的现状与发展方向．延边大学农学学报，2002，24(3)：34～35
[8]韩联生，颜素珍．中国食用菌产业发展的现状与应采取的对策．中国林副特产，1995，34(3)：31～35
[9]黄毅．食用菌栽培．北京：高等教育出版社，1998，12
[10]谢宝贵，吕做舟，江玉姬．食用菌储藏与加工实用技术．北京：农业出版社，1994，14～15
[11]苟中兰．食用菌的营养价值及医疗保健功能．川东学刊，1995，5(2)：104～107
[13]王素媛．食用菌的代谢产物．生物学教学，2001，26(9)：35～38
[14]吕岱人．食用菌与人类生态环境．青岛建筑工程学院学报，1994，15(1)：23～30
[15]冯帆，屈飞．真菌的分类、价值与利用．陕两师范大学继续教育学报，2003，20(3)：117～119
[16]彭克俭．食用菌的种质保存．中国食用菌，2000，21(3)：7～10
[17]戴芳澜．中国真菌总汇．北京：科学出版社，1979，23～26
[18]刘日新．食用菌的研究与利用．中国食刚菌，1999，17(4)：5～8
[19]上海农业科学院食用菌研究所．中国食用菌志．北京：中国林业出版社，1991，116～117
[20]李志超，杨珊珊．食药用菌生产与消费指南．北京：中国农业出版社，1997，6～14
[21]娄隆后，朱慧真，周璧华．食用菌生物学及栽培技术．北京：中国林业出版社，1984，11
[22]杨庆尧．食用菌生物学基础．上海：上海科技出版社，1981，6～14
[23]裘娟萍，孙培龙，朱家荣等．灰树花深层发酵培养基的研究．微生物学通报，2000，27(4)：275～278
[24]谭伟．长根金钱菌生物学特性研究．食用菌学报，2001，8(3)：16～22
[25]阎培生，李桂舫，蒋家慧等．大球盖菇菌丝生长的营养需求及环境条件．食用菌学报，2001，8(1)：5～9
[26]杨新美．中国菌物学传承与开拓．北京：中国农业出版社，2001，9
[27]郭倩，何庆邦．四孢蘑菇生长过程中四种孢外酶活性和木质素降解的变化规律．食用菌学报，1998，5(2)：13～17
[28]肖光辉．香菇大分子碳源代谢的研究．食用菌学报，1994，1(1)：31～35
[29]潘迎捷，倪新江，李人圭．香菇生长过程中木质素纤维素的生物降解规律．食用菌学报，1995，2(2)：18～22
[30]严培兰，高君辉，谭琦等．黑木耳的抗霉能力、产量性状与不同胞外酶活的相关性．用菌学报，1999,6(1)：5～8
[31]肖光辉．香菇大分子碳源代谢的研究．食用菌学报，1994，1(1)：31～35
[32]杨新美．中国食用菌栽培学．北京：农业出版社．1988，1～5，530～532
[33]黄年来．中国食用菌百科．北京：中国农业出版社．1993，125～210
[34]张光亚．云南食用菌．昆明：云南人民出版社．19884，476～478
[35]MazurX. BeckerU' AnkeT. et al. Two new bioactive diterpenes from Lepista sordida Phytochemistry . 1996, 43(2): 40～407
[36]罗新毅，洪江，张勇民．花脸香蘑氨基酸研究．氨基酸和生物资源，2003，25(3)：14～15
[37]罗新毅，洪江，张勇民．花脸香蘑元素测定．中国食用菌，2003，22(4)：43～48
[38]卯晓岚．中国经济真菌．北京：科学出版社，1998，223～225
[39]Casteel D. A. Peroxy natural products. Prod Rep, 1999, 16:55～73
[40]高锦明，杨雪，刘吉开等．紫丁香蘑的化学成分．中草药，2002，33(5)：398～402
[41]倪新江，冯志勇，梁丽琨等．鸡腿菇对棉籽壳的降解与转化．微生物学通报，2002，29(2)：1～4
[42]牛福文，印桂玲，刘宝增．黑木耳栽培两种培养基主要组分的降解和有关酶活的变化．微生物学通报，1990，17(4)：
[43]田果廷，杨琼芳，徐学忠．紫花脸香蘑驯化栽培研究．食用菌学报，2003，10(1)：52～56
[44]卢成英，李鹄鸣，钟以举．紫晶香蘑生物学研究．生态学杂志，1994，13(4)：37～41
[45]江枝和，朱丹，杨佩玉．姬松茸生物学特性研究．食用菌学报，1996，3(3)：5～12
[46]杜巍，李元瑞，袁静等．灰树花液体深层培养条件的研究．西北农林科技大学学报，2002，30(1)：21～24
[47]王宜磊．侧耳液体培养特性及胞外酶活性研究．中国食用菌，2000，19(4)：33～35
[48]潘迎捷，陈明杰．香菇生长发育过程中酶活性的变化．上海农业学报，1991，7(2)：21～26
[49]李合生．植物生理生化试验原理和技术．北京：高等教育出版社，2000，184～185
[50]谢君，任路，张义止．侧耳菌产生小质纤维素酶及其降解植物生物质的研究．兰州大学学报，2002，38(2)：121～125
[51]倪新江，丁立孝，潘迎捷等．姬松茸在两种培养基上生长期间九种胞外酶活性变化．菌物
系统，2001， 20(2)：222～227
[52]杨新关．食用菌研究法．北京：中国农业出版社，1998，176～180
[53]李合生．植物生理生化试验原理与方法．北京：中国轻工业出版社，2000，29～32
[54]佟晓华，张强，洛淑华．二株霉菌的术聚糖酶活性测定．农业与技术，1997，11(6)：29～33
[55]王宜磊，邓振旭，朱陶等．彩绒革盖菌CV-8漆酶活性的初步研究．微生物学杂志，1998，18(4)：61～65
[56]王宜磊，赵良田．彩绒革盖菌多酚氧化酶活性研究．微生物学通报，1999，16(4)：454～456
[57]张凤琴．不同糖类对鸡腿蘑胞外酶活性及多糖分泌的影响．食用菌，1999，21(4)：5～6
[58]杨安贵．农业试验设计基础及统计分析重庆：重庆大学出版社，1994，88～102
[59]肖玉珍，赵静珍．花脸蘑(Lepista Sordida)人工驯化栽培技术的研究．东北农业大学学报，1995，26(1)：7～12
[60]饶军，饶文龙．花脸香蘑菌种培养基筛选．中国食用菌，2000，19(2)：9
[61]黄新汉．几种食用菌菌丝对不同碳氮源的利用．食用菌，1990，12(3)：10～11
[62]向世华．食用真菌的营养生理．中国食用菌，1990，9(5)：13～14
[63]申慧彦，刘朝贵．花脸蘑菌丝营养特性的研究．食用菌，2003，(3)：5
[64]江枝和，李三暑，郑永标等．虎奶菇生物学特性研究．食用菌学报，2000，7(4)：11～17
[65]卢成英．紫晶香蘑生物学特性及栽培研究初报．吉首大学学报，1994，15(4)：82～88
[66]陈士瑜．菇菌生产技术全书．北京：中国农业出版社，1999，28
[67]龚建华，苏华．药用蕈菌姬松茸液体培养的菌丝形态学特征．应用与环境生物学报，2001，7(6)：593～599
[68]谢君，任路，张义正．侧耳产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究．兰州大学学报，2002，38(2)：121～128
[69]Higuchi .T.H. Biodegradation of lignin: biochemistry and potential application. Expertia, 1982, 38: 159～166
[70]李亮亮，牛森．纤维素酶活力测定方法的比较研究．辽宁农业科学，2001(4)，16～18
[71]曾荣鉴．碳源和氮源对平菇菌丝胞外酶的诱导作用．食用菌，1992，14(1)：17～18
[72]王佳玲，余惠生，付时雨．白腐菌漆酶的研究进展．微生物学通报，1998，25(4)：233～235
[73]Wood. D. A. Inactivation of extracelluar laccse of Agaricus bisporrus during fruiting. J. Gen. Microbiol. 1980, 117: 339～345
[74]Johne E. The filamentous fungi. Fungal technology, 1983(4): 265
[75]Shamala T. R. Screekantian K. R. Production of cellulase and D-xylanase by some selected fungal isolases. Enzyme microb. Technol, 1986, 8(3): 178～182
[76]林亲雄，陈京元．碳源和氮源对松乳菇菌丝生长的影响．食用菌学报，2002，9(1)：44～46
[77]A. K. Saka, N. Damajpati. Effect of carbon sources on the growth and protein production of Collybia diminuta, Tricholoma lobayense and Oudemansiella canarii in submerged culture. Mush. J. for the tropics. 1990, 10(3): 69～73
[78]潘继红，曹霞，李峰等．灵芝液体培养营养需求的探讨．食用菌学报，1997，4(1)：31～34
[79]陈惠群，刘洪玉，李子平．中国块菌主要生理特性初步研究．食用菌学报，1998，5(4)：26～30
[80]党建章，何宗智，江保国等．茶薪菇菌丝液体培养的营养需求．微生物学杂志，1999，19(2)：11～13
[81]郑福琴，杨瑞长，刘日心．蘑菇培养料的碳氮比与养分和产量的关系．上海农业学报，1995，11(1)：33～38
[82]钟雪美，屈亮．麦草培养料碳氮比值对平菇生长发育和产量的影响．中国食用菌，1988，11(1)：17～19
[83]王秉峰，李玉珍．深层培养紫孢侧耳菌丝体的研究．食用菌学报，1995，2(3)：11～17
[84]王宜磊．碳源和氮源对彩绒革盖菌小质纤维素和木质素酶分泌的影响．微生物学杂志，2000，20(1)：29～31
[85]郭杰炎，蔡武城．微生物酶．北京：科学出版社，1986，30～62
[86]Alan Fersht．酶的结构利作用机制．北京：北京大学出版社，1991，283～29
[87]尉晓宇．食用菌酶学的应用研究．中国食用菌，1990，9(5)：15～16
[88]wood D. Substrate bioconversion by Agaricus bisporus. The proceeding of 98 nanjing International Symposium onscience and cultivation of mushrooms. 1998, 17～23
[89]王玉万，王云．构菌栽培过程中对木质纤维素的降解和几种多糖分解酶活性的变化．微生物通报，1989，16(3)：137～140
[90]潘迎捷，陈明杰，郑海歌等．香菇和平菇生长发育中漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性的变化．上海农业学报，1991，7(2)：21～26