小蓟叶片上链格孢菌的研究
摘要
小蓟是农田中发生危害较严重的杂草之一。目前主要依赖化学除草剂进行防除,由于化学除草存在诸多不利因素,因此利用生防手段来防治小蓟,将是消除小蓟危害的一条新途径。开发微生物除草剂最基础的工作就是要筛选出杂草生防潜力菌种(株)。从自然发病的小蓟标本上分离到3个特色的小蓟病原真菌:LD-1,LD-2,和LD-3。筛选出LD-1为小蓟生防潜力菌,经鉴定为链格孢(Alternaria)。对其安全性、形态特征、生物学特性、流行病学及毒素的致病机理进行了系统研究。结果如下:
1.小蓟链格孢菌在实验中表现优良,菌丝生长快,产孢力强,对小蓟致病力也很高,且对玉米、大豆都安全。
2.小蓟链格孢菌丝在25℃,pH 7.88, PDA培养基上,及以硝酸钠为氮源的培养基上,菌丝生长最快,产孢量最大。在光暗交替条件下,以葡萄糖为碳源的培养基上链格孢菌菌丝生长快;在全黑暗条件下,以乳糖为碳源的培养基上产孢多;链格孢菌致死温度为60℃水浴10 min。
3.以5.0×107个孢子/mL浓度的链格孢菌喷雾接种,接种后保持25～28℃, RH 95%以上24 h, 18 h光照/6 h黑暗或更长的黑暗时间,对小蓟的防除可达到最佳效果。链格孢菌对1～5叶期的小蓟均有较好的致病性,为获得最佳防效,宜在小蓟3叶期以前使用。
4.小蓟链格孢菌能在PDA培养基上可产生黑色毒素。链格孢发酵滤液(毒素)与该菌孢子混合,或结合(先后喷雾)使用,对小蓟的防治效果比单独喷雾孢子或发酵滤液有所提高。特别是链格孢孢子与改良Fries发酵培养液共同作用下,感病株率可达68.5%以上,死株率为11.4%以上,远远高于单独使用孢子或发酵液。
Thistle is one of weeds that caused sevrious disserve in farmland.At present,the chemical herbicides are used to get rid of it,but it presents much disadvantage factors,so control the thistle with biocontrol method will be a new pathway to eliminate the disserve of thistle.The basic task to develop microbial herbicides is to filter potential biocontrol fungi.Three pathogenic fungi were separated from thistle:LD-1、LD-2 and LD-3. Among the fungi,LD-1 was the biocontrol potential fungus and was identified as Alternaria.We research the security、morphic characteristic、biology characteristic、epidemiology and the nosogenesis of toxin systemically.The results are as follows:
1.The mycelia of Alternaria grows fast and has strong ability to produce spores in the experiment.The funfus has high pathogenity to the thistl,but safe to corn and soybean.
2.The optimum pH value for the mycelia growth and sporulation of Alternaria is 7.88 at 25℃on PDA medium or the medium that sodium nitrate as nitrogen source.Under the condition of alternating light and dark,the mycelia grow fastest on the medium that dextrose as carbon source; The quantity of the pathogen sporulation is most on the medium that lactose as carbon source in complete darkness condition;The fatal temperature of the pathogen is 60℃in water bath for 10 minutes.
3.Spraying the spores with concentrtion of 5.0×107/mL to inoculate Alternaria,after inoculum the temperature should be keep at 25～28℃,RH above 95% for 24 h,and 18 h illumination/6 h darkness or longer darkness can reach to the best efficacy to thistle.Alternaria has pathogenity to thistle with 1～5leaves,to abtain the best efficacy,it should be used before 3 leaves.
4.The research indicated that Alternaria could produce black toxin on PDA medium.The efficacy of mixture of fermentation filtrate (toxin) and spores of Alternaria or combination use both of two is better than only apraying spores or fermentation filtrate.Especially under the combined action of spores of Alternaria and improved Fries fermentation, the ratio of susceptable plants and dead plants are 68.5% and 11.4%,respectivly,which are higher than thoseonly use spores or fermentation.
1.小蓟链格孢菌在实验中表现优良,菌丝生长快,产孢力强,对小蓟致病力也很高,且对玉米、大豆都安全。
2.小蓟链格孢菌丝在25℃,pH 7.88, PDA培养基上,及以硝酸钠为氮源的培养基上,菌丝生长最快,产孢量最大。在光暗交替条件下,以葡萄糖为碳源的培养基上链格孢菌菌丝生长快;在全黑暗条件下,以乳糖为碳源的培养基上产孢多;链格孢菌致死温度为60℃水浴10 min。
3.以5.0×107个孢子/mL浓度的链格孢菌喷雾接种,接种后保持25～28℃, RH 95%以上24 h, 18 h光照/6 h黑暗或更长的黑暗时间,对小蓟的防除可达到最佳效果。链格孢菌对1～5叶期的小蓟均有较好的致病性,为获得最佳防效,宜在小蓟3叶期以前使用。
4.小蓟链格孢菌能在PDA培养基上可产生黑色毒素。链格孢发酵滤液(毒素)与该菌孢子混合,或结合(先后喷雾)使用,对小蓟的防治效果比单独喷雾孢子或发酵滤液有所提高。特别是链格孢孢子与改良Fries发酵培养液共同作用下,感病株率可达68.5%以上,死株率为11.4%以上,远远高于单独使用孢子或发酵液。
Thistle is one of weeds that caused sevrious disserve in farmland.At present,the chemical herbicides are used to get rid of it,but it presents much disadvantage factors,so control the thistle with biocontrol method will be a new pathway to eliminate the disserve of thistle.The basic task to develop microbial herbicides is to filter potential biocontrol fungi.Three pathogenic fungi were separated from thistle:LD-1、LD-2 and LD-3. Among the fungi,LD-1 was the biocontrol potential fungus and was identified as Alternaria.We research the security、morphic characteristic、biology characteristic、epidemiology and the nosogenesis of toxin systemically.The results are as follows:
1.The mycelia of Alternaria grows fast and has strong ability to produce spores in the experiment.The funfus has high pathogenity to the thistl,but safe to corn and soybean.
2.The optimum pH value for the mycelia growth and sporulation of Alternaria is 7.88 at 25℃on PDA medium or the medium that sodium nitrate as nitrogen source.Under the condition of alternating light and dark,the mycelia grow fastest on the medium that dextrose as carbon source; The quantity of the pathogen sporulation is most on the medium that lactose as carbon source in complete darkness condition;The fatal temperature of the pathogen is 60℃in water bath for 10 minutes.
3.Spraying the spores with concentrtion of 5.0×107/mL to inoculate Alternaria,after inoculum the temperature should be keep at 25～28℃,RH above 95% for 24 h,and 18 h illumination/6 h darkness or longer darkness can reach to the best efficacy to thistle.Alternaria has pathogenity to thistle with 1～5leaves,to abtain the best efficacy,it should be used before 3 leaves.
4.The research indicated that Alternaria could produce black toxin on PDA medium.The efficacy of mixture of fermentation filtrate (toxin) and spores of Alternaria or combination use both of two is better than only apraying spores or fermentation filtrate.Especially under the combined action of spores of Alternaria and improved Fries fermentation, the ratio of susceptable plants and dead plants are 68.5% and 11.4%,respectivly,which are higher than thoseonly use spores or fermentation.
引文
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