东北林蛙蝌蚪的蛋白质需要及圈养对成蛙形态和生产性能影响的研究
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摘要
本研究分为三部分，即东北林蛙(Rana dybowskii)蝌蚪的蛋白质需要试验、圈养对成蛙体型及产油量的影响和圈养对产品质量的影响。
在试验一中，依据蛋白质来源(动物性和植物性)和水平设计了10种饲粮(F1-F10)，进行室内人工饲养林蛙蝌蚪试验。将试验蝌蚪分成10组(T1-T10)，分别饲喂这10种饲粮。在饲养过程中，间隔5d采集蝌蚪样品一次，测定体重、干物质量及变态指标等。试验结果如下：
饲粮对林蛙蝌蚪的生长发育有明显影响，组间差异极显著(P＜0.01)。随着饲粮粗蛋白水平的提高，蝌蚪的生长发育加快：蝌蚪的增重加快、最大体重增加、开始变态的时间提前、变态期缩短。林蛙蝌蚪为杂食性，其生长发育与饲粮蛋白源无关，而与饲粮粗蛋白水平有关。试验期林蛙蝌蚪的最大体重、蝌蚪干物质最大沉积量、变态幼蛙的体重与饲粮CP水平呈正线性相关，相关系数分别为0.800、0.858和0.859：蝌蚪开始变态日龄、蝌蚪变态时间均与饲粮CP水平呈负线性相关，相关系数分别为-0.966和-0.892。综合蝌蚪生长、变态及健康评分结果，林蛙蝌蚪饲粮的适宜粗蛋白水平应为≥15％。
试验二，从外部形态(“八”字斑、背部斑纹及颜色、腹部颜色、后肢斑纹等)、体型指标(体长、后肢长、体重、重／长比、肥满度等)和产油量等方面对成体野生林蛀和圈养林蛙进行比较测定，并对各指标相互间的相关性进行分析，以初步研究人工养殖条件对林蛙生物学特征及生产性能的影响。试验结果如下：圈养雌性林蛙体表背部有黑斑的比例极显著(P＜0.01)地较野生的减少，腹部颜色有变浅的趋势。圈养雌性林蛀体长、体重、后肢长、肥满度、重长比及产油量与野生雌性林蛙差异极显著(P＜0.01)，圈养雌性林蛙较野生雌性林蛙体长减小、后肢缩短、肥满度增加、重长比增加、产油量升高。圈养条件提高了雌性成蛙的产油量与体长的相关系数(P＜0.01)，降低了产油量与肥满度的相关系数(P＜0.01)：而圈养条件对产油量与后肢长、体重及重长比的相关系数无影响(P＞0.05)。圈养雌性林蛙的体重与体长、体长与后肢长的相关系数极显著地高于野生雌蛙(P＜0.01)。
试验三，在第二部分试验的基础上，采用化学分析及仪器分析的方法，进一步在野生林蛙和圈养林蛙之间进行比较研究。主要内容有：蛙油的比较研究、蛙
皮成分的比较研究、蛙骨肉成分的比较研究。研究项「!包括一般性状(颜色、光
泽度、透明性、膨胀度)、常规化学成分(粗蛋白质、粗脂肪、胆固醇、磷脂等含
量)、氨丛酸、微量元素、多糖、蛙皮)Jk类及脂肪酸等，以分析圈养条件对林蛙产
生的实质性影响。试验结果如下。
野生蛙油与圈养蛀汕在外观上存在差异:主要体现在颜色上的区别。野生自
然阴干的当年蛙油为金黄至黄白色，而圈养自然阴干的当年蛙油为肉色至浅黄色。
圈养蛙油与野生蛀油的化学成分有明显差异:野生蛙油的粗蛋白含量较圈养
蛙油的高出5.19%。圈养蛙油中粗脂肪的含量是野生蛀油的2.7倍;野生蛙油的
总磷脂和胆固醇含量分别为圈养蛙汕对应指标的1 19.5%和125.8%。蛙汕样品含氨
基酸的种类不同，圈养蛙油未检出Ala;在蛙油的氨基酸含量上，圈养蛙油中Lys
含量(2.41%)比野生蛙汕的(l .33%)高;圈养蛀油的必需氨基酸比例和E/N值
分别为野生蛙油的和1 13.18%和129.41%。圈养蛙油中Z门的含量95.577ug/g是野
生蛙沮1中含量(24.ss6ug/g)的3.9倍，eu的含量由0.409 ug/g提高到0.637 ug/g，
Mn的含量由20.488 ug/g降低到17.841 ug/g。野生蛀油的多糖含量是圈养蛙油
的108.78%。野生蛙油与圈养蛙油均主要含有C14:0、C15:0、C16:0、C17:0、
C18:1、C18:0及3种分子量相同而分子结构不同的C18:2;两样品中C18:0
和C18:l的相对含量明显不同(野生蛙油分别为8.14%和12.85，圈养蛙油则为
10.12%和10.84)。二者的四种不饱和脂肪酸总相对含量分别为33.35%和36.86%，
野生蛙汕比圈养蛙油高3.51%。二者均含有大量的亚油酸，三种亚油酸的总相对
含量:野生蛙油为24.01%，圈养蛙油为23.07%。野生蛙油的亚油酸含量高于圈养
蛙油。
圈养蛙皮与野生蛙皮在化学组成上有差异:圈养蛙皮的粗脂肪和总磷脂含量
分别高于野生蛙皮10.88%和巧.14%;野生早蛙皮的Ca、P含量(0.1962%和
0.6404%)较圈养的(0.1 150%和0.5228%)分别高出70.61%和22.49%，圈养蛙皮
的Zn含量较高(268.255ug/g对234.521ug/g)，高出14.38%;野生雌蛙皮较圈
养雌蛙皮的80%甲醇提取率高2.36%;圈养蛙皮与野生蛙皮55%、60%、65%、70%
和75%乙醇洗脱物的组成氨基酸种类存在差异:野生样品的55%乙醇组分未检出
Tyr、Met和Arg，60%乙醉组分未检出Leu、Tyr、Met和Arg，65%乙醇组分未检
卫
尹~/
出Asl)、Gly、1 le、l〕he、Met和Arg，70%乙醇组分未检出Arg，75%乙醇组分未
检出M以和Phe;圈养样品的55%乙醇组分未检出T}rr和Met，60%乙醇组分未检
出Arg，65%乙醉组分未检出Arg，70%乙醇组分未检出Glu、Met和Arg，75%乙醇
洗脱组分未检出Glu和Met。
圈养林蛙骨肉粉与野生林蛙骨肉粉的化学组成相似:粗蛋白、总磷脂及胆固
醇的含量均相似，雌、雄两性之间的上述指标测定值也相近，圈养林蛙骨肉粉EE
含量为9.615%，显著(P<0 .05)
In this study, effects of dietary protein levels on the growth of tadpole and pen rearing on morphological characteristics and product quality of northeast forest frog were investigated.
In the first experiment, 10 diets with different levels and sources of proteins were fed to 10 groups of tadpoles kept in laboratory. Tadpole samples were collected and weighed every 5-day. Metamorphosis rate and duration of tadpole phase of each group were also recorded.
Dietary treatments had significant effect on the growth and development of tadpoles (P<0.01).
As dietary CP levels increased, tadpoles grew faster and LBW gain was increased during testing time. Maximum LBW of the tadpole, highest DMD and LBW of new metamorphosed frogs were positively and linearly related to dietary CP levels. The time of both tadpoles' phase and metamorphosis were negatively related to dietary CP levels with correlation coefficients being -0.966 and -0.892 respectively.
Tadpoles were omnivorous. Their growth was related to dietary CP levels, not related to sources of dietary CP. In terms of tadpoles' growth, metamorphosis and health mark, dietary CP requirement for tadpole wasl 5%.
In the second experiment, comparative analysis of morphological characteristics, body type indexes and production performance of Oviductus Ranae were carried out to detect the effect of pen rearing on forest frog. The results were showed as follows:
The rate of forest frog with dark spots on the back of pen fed frogs was significantly decreased (P<0.01) compared with the wilds. The color of belly skin tended to become light in pen fed frogs. Compared with wild female frogs, the pen fed females was shorter in body length (BL), shorter in hind leg length (HLL), but bigger in body weight (BW), higher in relative fatness (RF), higher in body weight/body length index (WLI) and higher in yield of Oviductus Ranae (YOR). The correlation coefficient between BL and YOR in pen rearing female frogs was significantly
(P<0.01) increased, compared with that of the wild females.
The correlation coefficients between YOR and HLL, YOR and BW, YOP and WLI in pen fed female frogs did not differ (P>0.05) from those in the wild females. In addition, the correlation coefficients between BW and BL, BL and HLL in pen fed female frogs were significantly (P<0.01) increased compared with those of the wild females.
In the third part of this study, the effect of pen feeding on chemical components of the OR , meat and bone meal and skin of forest frog was evaluated. Items analyzed included common shape and properties (color, fatty luster, transparency and coefficient of expansion ), common chemical components (CP, CF, cholesterol, total phosphoiipids, etc.), amino acids, trace elements, total polysaccharides, fatty acids and peptides.
The color of OR differed significantly between wild and pen fed frogs. The color of wild OR was from golden-yellow to yellow white before the end of the producing year. While, the color of pen rearing OR was from yellowish pink to light yellow.
There were some significant differences in chemical components between wild OR and pen rearing OR. CP of wild OR was higher than that of pen rearing OR by 5.19%. EE of pen rearing OR was 2.7 times as high as that of wild OR. The contents of total phosphoiipids and cholesterol of wild OR were higher than those in pen rearing OR by 19.5%and 25.8% respectively. Ala was not found in pen rearing OR. Lys in pen rearing OR was higher than that in wild OR by 81.2%. Both total relative content of essential amino acids and E/N (essential amino acids/non-essential amino acids) in pen rearing OR were higher than those in wild OR by 13.18% and 29.41% respectively. In pen rearing OR, the contents of Zn and Cu were 3.9and 1.6 times of those in wild OR. The content of Mn in wild OR was 14.8% higher than that in pen rearing OR. The content of total polysaccharides of wild OR was 8.78% higher than that of pen rearing OR. GC/MS was applied to study fatty acids in the two samples above. Results showed that both wild OR and pen rearing OR ma
在试验一中，依据蛋白质来源(动物性和植物性)和水平设计了10种饲粮(F1-F10)，进行室内人工饲养林蛙蝌蚪试验。将试验蝌蚪分成10组(T1-T10)，分别饲喂这10种饲粮。在饲养过程中，间隔5d采集蝌蚪样品一次，测定体重、干物质量及变态指标等。试验结果如下：
饲粮对林蛙蝌蚪的生长发育有明显影响，组间差异极显著(P＜0.01)。随着饲粮粗蛋白水平的提高，蝌蚪的生长发育加快：蝌蚪的增重加快、最大体重增加、开始变态的时间提前、变态期缩短。林蛙蝌蚪为杂食性，其生长发育与饲粮蛋白源无关，而与饲粮粗蛋白水平有关。试验期林蛙蝌蚪的最大体重、蝌蚪干物质最大沉积量、变态幼蛙的体重与饲粮CP水平呈正线性相关，相关系数分别为0.800、0.858和0.859：蝌蚪开始变态日龄、蝌蚪变态时间均与饲粮CP水平呈负线性相关，相关系数分别为-0.966和-0.892。综合蝌蚪生长、变态及健康评分结果，林蛙蝌蚪饲粮的适宜粗蛋白水平应为≥15％。
试验二，从外部形态(“八”字斑、背部斑纹及颜色、腹部颜色、后肢斑纹等)、体型指标(体长、后肢长、体重、重／长比、肥满度等)和产油量等方面对成体野生林蛀和圈养林蛙进行比较测定，并对各指标相互间的相关性进行分析，以初步研究人工养殖条件对林蛙生物学特征及生产性能的影响。试验结果如下：圈养雌性林蛙体表背部有黑斑的比例极显著(P＜0.01)地较野生的减少，腹部颜色有变浅的趋势。圈养雌性林蛀体长、体重、后肢长、肥满度、重长比及产油量与野生雌性林蛙差异极显著(P＜0.01)，圈养雌性林蛙较野生雌性林蛙体长减小、后肢缩短、肥满度增加、重长比增加、产油量升高。圈养条件提高了雌性成蛙的产油量与体长的相关系数(P＜0.01)，降低了产油量与肥满度的相关系数(P＜0.01)：而圈养条件对产油量与后肢长、体重及重长比的相关系数无影响(P＞0.05)。圈养雌性林蛙的体重与体长、体长与后肢长的相关系数极显著地高于野生雌蛙(P＜0.01)。
试验三，在第二部分试验的基础上，采用化学分析及仪器分析的方法，进一步在野生林蛙和圈养林蛙之间进行比较研究。主要内容有：蛙油的比较研究、蛙
皮成分的比较研究、蛙骨肉成分的比较研究。研究项「!包括一般性状(颜色、光
泽度、透明性、膨胀度)、常规化学成分(粗蛋白质、粗脂肪、胆固醇、磷脂等含
量)、氨丛酸、微量元素、多糖、蛙皮)Jk类及脂肪酸等，以分析圈养条件对林蛙产
生的实质性影响。试验结果如下。
野生蛙油与圈养蛀汕在外观上存在差异:主要体现在颜色上的区别。野生自
然阴干的当年蛙油为金黄至黄白色，而圈养自然阴干的当年蛙油为肉色至浅黄色。
圈养蛙油与野生蛀油的化学成分有明显差异:野生蛙油的粗蛋白含量较圈养
蛙油的高出5.19%。圈养蛙油中粗脂肪的含量是野生蛀油的2.7倍;野生蛙油的
总磷脂和胆固醇含量分别为圈养蛙汕对应指标的1 19.5%和125.8%。蛙汕样品含氨
基酸的种类不同，圈养蛙油未检出Ala;在蛙油的氨基酸含量上，圈养蛙油中Lys
含量(2.41%)比野生蛙汕的(l .33%)高;圈养蛀油的必需氨基酸比例和E/N值
分别为野生蛙油的和1 13.18%和129.41%。圈养蛙油中Z门的含量95.577ug/g是野
生蛙沮1中含量(24.ss6ug/g)的3.9倍，eu的含量由0.409 ug/g提高到0.637 ug/g，
Mn的含量由20.488 ug/g降低到17.841 ug/g。野生蛀油的多糖含量是圈养蛙油
的108.78%。野生蛙油与圈养蛙油均主要含有C14:0、C15:0、C16:0、C17:0、
C18:1、C18:0及3种分子量相同而分子结构不同的C18:2;两样品中C18:0
和C18:l的相对含量明显不同(野生蛙油分别为8.14%和12.85，圈养蛙油则为
10.12%和10.84)。二者的四种不饱和脂肪酸总相对含量分别为33.35%和36.86%，
野生蛙汕比圈养蛙油高3.51%。二者均含有大量的亚油酸，三种亚油酸的总相对
含量:野生蛙油为24.01%，圈养蛙油为23.07%。野生蛙油的亚油酸含量高于圈养
蛙油。
圈养蛙皮与野生蛙皮在化学组成上有差异:圈养蛙皮的粗脂肪和总磷脂含量
分别高于野生蛙皮10.88%和巧.14%;野生早蛙皮的Ca、P含量(0.1962%和
0.6404%)较圈养的(0.1 150%和0.5228%)分别高出70.61%和22.49%，圈养蛙皮
的Zn含量较高(268.255ug/g对234.521ug/g)，高出14.38%;野生雌蛙皮较圈
养雌蛙皮的80%甲醇提取率高2.36%;圈养蛙皮与野生蛙皮55%、60%、65%、70%
和75%乙醇洗脱物的组成氨基酸种类存在差异:野生样品的55%乙醇组分未检出
Tyr、Met和Arg，60%乙醉组分未检出Leu、Tyr、Met和Arg，65%乙醇组分未检
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检出M以和Phe;圈养样品的55%乙醇组分未检出T}rr和Met，60%乙醇组分未检
出Arg，65%乙醉组分未检出Arg，70%乙醇组分未检出Glu、Met和Arg，75%乙醇
洗脱组分未检出Glu和Met。
圈养林蛙骨肉粉与野生林蛙骨肉粉的化学组成相似:粗蛋白、总磷脂及胆固
醇的含量均相似，雌、雄两性之间的上述指标测定值也相近，圈养林蛙骨肉粉EE
含量为9.615%，显著(P<0 .05)
In this study, effects of dietary protein levels on the growth of tadpole and pen rearing on morphological characteristics and product quality of northeast forest frog were investigated.
In the first experiment, 10 diets with different levels and sources of proteins were fed to 10 groups of tadpoles kept in laboratory. Tadpole samples were collected and weighed every 5-day. Metamorphosis rate and duration of tadpole phase of each group were also recorded.
Dietary treatments had significant effect on the growth and development of tadpoles (P<0.01).
As dietary CP levels increased, tadpoles grew faster and LBW gain was increased during testing time. Maximum LBW of the tadpole, highest DMD and LBW of new metamorphosed frogs were positively and linearly related to dietary CP levels. The time of both tadpoles' phase and metamorphosis were negatively related to dietary CP levels with correlation coefficients being -0.966 and -0.892 respectively.
Tadpoles were omnivorous. Their growth was related to dietary CP levels, not related to sources of dietary CP. In terms of tadpoles' growth, metamorphosis and health mark, dietary CP requirement for tadpole wasl 5%.
In the second experiment, comparative analysis of morphological characteristics, body type indexes and production performance of Oviductus Ranae were carried out to detect the effect of pen rearing on forest frog. The results were showed as follows:
The rate of forest frog with dark spots on the back of pen fed frogs was significantly decreased (P<0.01) compared with the wilds. The color of belly skin tended to become light in pen fed frogs. Compared with wild female frogs, the pen fed females was shorter in body length (BL), shorter in hind leg length (HLL), but bigger in body weight (BW), higher in relative fatness (RF), higher in body weight/body length index (WLI) and higher in yield of Oviductus Ranae (YOR). The correlation coefficient between BL and YOR in pen rearing female frogs was significantly
(P<0.01) increased, compared with that of the wild females.
The correlation coefficients between YOR and HLL, YOR and BW, YOP and WLI in pen fed female frogs did not differ (P>0.05) from those in the wild females. In addition, the correlation coefficients between BW and BL, BL and HLL in pen fed female frogs were significantly (P<0.01) increased compared with those of the wild females.
In the third part of this study, the effect of pen feeding on chemical components of the OR , meat and bone meal and skin of forest frog was evaluated. Items analyzed included common shape and properties (color, fatty luster, transparency and coefficient of expansion ), common chemical components (CP, CF, cholesterol, total phosphoiipids, etc.), amino acids, trace elements, total polysaccharides, fatty acids and peptides.
The color of OR differed significantly between wild and pen fed frogs. The color of wild OR was from golden-yellow to yellow white before the end of the producing year. While, the color of pen rearing OR was from yellowish pink to light yellow.
There were some significant differences in chemical components between wild OR and pen rearing OR. CP of wild OR was higher than that of pen rearing OR by 5.19%. EE of pen rearing OR was 2.7 times as high as that of wild OR. The contents of total phosphoiipids and cholesterol of wild OR were higher than those in pen rearing OR by 19.5%and 25.8% respectively. Ala was not found in pen rearing OR. Lys in pen rearing OR was higher than that in wild OR by 81.2%. Both total relative content of essential amino acids and E/N (essential amino acids/non-essential amino acids) in pen rearing OR were higher than those in wild OR by 13.18% and 29.41% respectively. In pen rearing OR, the contents of Zn and Cu were 3.9and 1.6 times of those in wild OR. The content of Mn in wild OR was 14.8% higher than that in pen rearing OR. The content of total polysaccharides of wild OR was 8.78% higher than that of pen rearing OR. GC/MS was applied to study fatty acids in the two samples above. Results showed that both wild OR and pen rearing OR ma
引文
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