STAT3对结肠癌细胞DLD-1上皮间质转化的影响
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摘要
研究背景:近年来,肿瘤EMT已成为最热门的医学科学议题之一,EMT是指上皮细胞失去细胞极性,并获得较高的迁移、侵袭、抗凋亡和降解细胞外基质的能力。在此过程中伴有多个细胞分子标志改变:上皮细胞标志物如E钙粘蛋白(E-cadherin)表达下调,而间质标志分子如神经钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及间质细胞转录因子如Slug,Snail,Twist,ZEB1异常激活。STAT3作为一种可以介导多种细胞外刺激信号及酪氨酸激酶通路活性的转录因子,可以通过调控基因表达来影响细胞的多种重要功能进而参与肿瘤的侵袭与转移,同时,它还与EMT现象形成紧密联系,共同参与肿瘤的侵袭和转移。目的:过表达STAT3观察结肠癌细胞DLD1体外增殖、侵袭特性的变化,以及上皮表型E-cadherin、间质表型Vimentin和N-cadherin的改变,探讨STAT3对结肠癌细胞上皮间质转化的影响。方法:实验分为对照组,载体组和实验组,MTT检测细胞增殖情况,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,RT-PCR、WB检测E-cadherin、N-cadherin、STAT3、和Vimentin基因及蛋白的表达变化。结果:STAT3过表达处理细胞后,与对照组和载体组比较,实验组细胞显著增殖(P<0.05,P<0.05)。三组穿过Matrigel胶的细胞数分别为(68.58±2.56)、(73.20±3.67)和(120.60±4.30)个/视野,与对照组和载体组比较,实验组细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量明显增加((P<0.05,P<0.05)。RT-PCR结果显示,实验组STAT3基因表达增高,细胞中上皮标志物E-cadherin基因表达量低于对照组和载体组(P<0.05,P<0.05),间质标志物N-cadherin和Vimentin基因表达量则高于对照组和载体组(P<0.05,P<0.05),WB结果显示细胞E-cadherin蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.01),STAT3、p-STAT3、N-cadherin和Vimentin蛋白表达量则显著升高(P<0.01,P<0.01)。结论:STAT3过表达引起结肠癌细胞发生上皮间质转化。
引文