Toll样受体调控鸡β-防御素2分泌机制的初探

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• 论文作者：刘诚刚 ; 齐甜铭 ; 赵文钧 ; 陈玉秋 ; 马得莹
• 年：2016
• 作者机构：东北农业大学动物科学技术学院;
• 论文关键词：AvBDs ; TLRs ; 通路抑制剂 ; 信号转导
• 会议召开时间：2016-10-21
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S831
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会
• 会议地点：中国湖北武汉
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物营养学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：1
• 文件大小：46k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一类重要的模式识别受体,当机体受到病原体感染时,TLRs识别相应的配体而活化,通过一系列级联反应,最终将调节并释放包括宿主防御肽(Host defensin peptides,HDPs)在内的多个基因的表达。HDPs是生物体产生的一类具有广谱抗菌活性的小分子多肽,是机体抵抗病原入侵的第一道防线。防御素为一类富含半胱氨酸的HDPs,目前,在禽类体内仅发现存在β-防御素。本研究旨在探讨人工合成TLRs激动剂对鸡β-防御素(avianβ-defensins,AvBDs)分泌调控的信号转导机制。分别使用6个人工合成TLRs激动剂:C型CpG单链寡核苷酸(ODN-M362)、鞭毛蛋白(FLA-ST)、脂多糖(LPS-B5)、咪唑喹啉(R848)、三酰脂肽(Pam3CSK4)和聚肌胞苷酸(polyI:C)刺激鸡胚成纤维细胞(CEF),分别在作用6、12和24h后,提取细胞RNA,采用Real-time PCR法检测AvBD 1-14基因表达量;在此基础上,进一步分别用MAPK(JNK、ERK和p38)和NF-κB通路抑制剂SP600125、PD 98059、SB 203580和PDTC孵育细胞1 h后,添加Toll样受体激动剂24h后,提取细胞RNA,采用Real-time PCR检测AvBD2基因表达量。结果表明:1)经上述6个TLRs激动剂刺激后,鸡CEF细胞中AvBD2基因表达量显著上调(P<0.05)。2)经MAPK和NF-κB通路抑制剂孵育后添加TLRs激动剂孵育24 h后,MAPK p38通路对鸡β-防御素2基因表达有明显抑制作用(P<0.01)。本研究结果揭示,在所检测的14个AvBDs中,只有AvBD2基因经TLRs激动剂(ODN-M362、FLA-ST、Pam3CSK4、polyI:C)刺激后,进一步通过MAPK p38通路介导生成。

引文