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黄曲霉菌组蛋白去乙酰转移酶Rtt109功能研究
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摘要
黄曲霉菌(Aspergillus flavus)是一种常见腐生性植物病原菌,同时也是致免疫功能缺陷动物曲霉病第二大病原菌。众多研究表明组蛋白乙酰化修饰在真菌发育,次级代谢发挥重要作用,但黄曲霉菌中组蛋白乙酰转移酶修饰作用未曾报道。本次研究我们采用同源重组的方法,构建了敲除黄曲霉组蛋白乙酰转移酶Rtt109突变体ΔAflrtt109。敲除rtt109导致黄曲霉生长速率降低,严重影响黄曲霉菌疏水性。ΔΔAflrtt109突变体导致黄曲霉菌丧失无性孢子的生成,同时影响了孢子合成相关基因brl A和aba A的表达。ΔΔAflrtt109菌株也影响了菌核的合成,显著下调与菌核合成转录调控基因nsd C与nsd D。黄曲霉毒素作为黄曲霉菌最重要的次级代谢产物,结果表明,ΔAflrtt109菌株导致黄曲霉毒素B1和B2的合成显著降低rtt109,与野生型相比,黄曲霉毒素合成的调控基因afl R与afl S均显著下调。压力应激结果表明,ΔAflrtt109菌株对基因组压力更加敏感,而未受到渗透压力和氧化压力的影响。侵染实验测定结果表明ΔAflrtt109菌株导致侵染玉米能力显著下降。Western blotting结果表明,敲除Rtt109导致H3-ac与H3K56-ac乙酰化水平显著降低。综上,本次研究我们阐明了组蛋白乙酰化转移酶Rtt109在黄曲霉生长发育与次级代谢调控的重要作用,目前在黄曲霉污染及黄曲霉毒素防控方面方法并未十分有效,本次研究为未来基因手段防控黄曲霉菌的污染提供一种重要可能的靶标,并奠定重要理论基础。
引文

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