用UPLC-HRMS/MS技术检测人尿中曲美他嗪新代谢物

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• 论文作者：马艳华 ; 赵君 ; 闫宽 ; 董颖
• 年：2016
• 作者机构：国家体育总局反兴奋剂中心;北京化工大学;
• 论文关键词：UPLC-HRMS/MS ; 曲美他嗪 ; 代谢物检测 ; 兴奋剂控制
• 会议召开时间：2016-10-21
• 会议录名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康论文摘要汇编
• 语种：中文
• 分类号：R872
• 学会代码：ZGTK
• 会议名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康
• 会议地点：中国江苏无锡
• 主办单位：中国体育科学学会运动生理与生物化学分会
• 学会名称：中国体育科学学会
• 页数：2
• 文件大小：98k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

研究目的:曲美他嗪是一种临床用于治疗冠脉功能不全、心绞痛、陈旧性心肌梗塞等疾病的药物,能促进心肌代谢及心肌能量的产生,降低心肌耗氧量及心肌能量的消耗,从而改善心肌氧的供需平衡。具有提高运动员心肌细胞能量储备,改善心脏功能,提高运动耐力的作用。2014年1月WADA将其列入禁用清单。本研究旨在使用超高压液相色谱与具有高分辨率和高灵敏度的轨道离子阱质谱仪联用技术,检测曲美他嗪在人尿中的新代谢产物,延长检测窗口期,并了解曲美他嗪在人体内的代谢规律。研究方法:首先进行人体受试实验,单次单剂量口服20 mg曲美他嗪,收集服药前空白尿和服药后3天全部尿样以及之后7天晨尿。采用固相萃取方法对空白和给药后尿样进行前处理,使用UPLC-Q Exctive plus质谱仪,Agilent Zorbax XDB-C18色谱柱(2.1mm×50mm×3.5μm),流动相为pH 3.5的10mM甲酸铵缓冲液(A)和乙腈(B),对样品进行全扫描和二级质谱数据采集。用Coumpound Discoverer和Mass Frontier软件对上述数据进行处理,根据代谢物组分精确质量数进行元素组成拟合(拟合一级和二级扫描质谱信息的元素组成),初步获得给药后尿样中可能的代谢物列表。进一步分析药物原形及代谢产物的一级和二级质谱图推测曲美他嗪代谢产物结构。研究结果:采用正离子模式对曲美他嗪原形和代谢物进行分析。发现服药75分钟后,在尿中开始出现药物原形;服药4小时后在尿中出现药物原形浓度峰值;服药10天后在尿中仍能检出低浓度药物原形。对代谢产物的二级质谱进行归属并推测结构,初步推测出受试后的尿样中含有20个代谢产物,其中11个为首次发现。这些新代谢物结构分别M1(didesmethyltrimetazidine),M2(piperazin-l-yl(2,3,4-trimethoxyphenyl)methanone),M3(曲美他嗪羟基化产物),M4(N-sulfo-N-(2,3,4-trimethoxybenzyl)glycine),M5(曲美他嗪磺酸化产物),M6(曲美他嗪羟基化并葡萄醛酸化产物)等。研究结论:本实验对曲美他嗪在人体内代谢规律进行研究,首次发现和鉴定11个新代谢产物,延长检测窗口期以防漏检。使用高灵敏度质谱仪以及功能强大的结构解析软件,使发现更多药物代谢物成为可能。

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