蛋氨酸二肽对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成相关基因表达的影响
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摘要
本试验旨在研究蛋氨酸(Met)二肽对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)内乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验以BMECs为体外培养模型,分为3个部分,均采用单因子完全随机试验设计,Met的添加浓度及培养时间参考课题组前期研究结果定为60μg/mL(0.402 mmol/L)、48h。试验1主要研究八种含Met二肽的处理组(蛋氨酸-蛋氨酸(P-Met-Met)、蛋氨酸-赖氨酸(P-Met-Lys)、蛋氨酸-色氨酸(P-Met-Trp)、蛋氨酸-苯丙氨酸(P-Met-Phe)、蛋氨酸-苏氨酸(P-Met-Thr)、蛋氨酸-异亮氨酸(P-Met-Ile)、蛋氨酸-亮氨酸(P-Met-Leu)、蛋氨酸-缬氨酸(P-Met-Val))对BMECs内乳蛋白合成相关基因[α_(s1)-酪蛋白(CSN1S1)、β-酪蛋白(CSN2)、κ-酪蛋白(CSN3)、β-乳球蛋白(LGB)、Ⅱ型小肽转运载体(PEPT2)和氨肽酶氮(APN)]表达以及细胞内外氨肽酶(APA)活性的影响。试验2主要研究与八种二肽对应的游离氨基酸(F-Met-Met、F-Met-Lys、F-Met-Trp、F-Met-Phe、F-Met-Thr、F-Met-Ile、F-Met-Leu、F-Met-Val)对BMECs乳蛋白合成相关基因表达以及细胞内外APA活性的影响。试验3主要研究二肽等量替代相应游离氨基酸对BMECs乳蛋白基因、PEPT2、APN基因表达以及细胞内外APA活性的影响。结果表明:1)P-Met-Met组和P-MetLys组较对照组和其他二肽处理组显著上调了CSN1S1和CSN2基因的表达(P<0.05),P-MetMet组优于P-Met-Lys组。2)F-Met-Met组和F-Met-Lys组较对照组和其他氨基酸处理组显著地促进了CSN1S1基因的表达(P<0.05)。3)除P-Met-Val组和P-Met-Leu组外,不同二肽组替代氨基酸后均不同程度地促进了乳蛋白基因和PEPT2基因的表达,其中P-Met-Met组表现出较好的促进效果,显著上调了乳蛋白CSN1S1、CSN2和CSN3基因的表达量(P<0.05),PEPT2的基因表达量有趋于显著的提高(P=0.10);以P-Met-Trp组、P-Met-Phe组、P-Met-Lys组的促进效果次之。综上所述,二肽等量替代游离氨基酸能够显著地促进乳蛋白基因的表达,其中尤以P-Met-Met组的效果最好。
引文