摘要
目的:研究蝙蝠葛苏林碱(DS)对缓激肽(BK)诱导神经细胞胞内钙升高的影响,并探讨其神经保护作用。方法:原代培养大鼠皮质神经元,应用BK(1μmol/L)诱导细胞内钙离子浓度升高;将细胞分为对照组,BK组,DS低、中、高剂量组;对照组不做任何处理,BK组给予1μmol/L的BK处理,DS低、中、高剂量组分别给予相应浓度(1×10~(-6)mol/L、1×10~(-5)mol/L、1×10~(-4)mol/L)的DS预孵育3 min,然后给予1μmol/L的BK处理。通过细胞内双波长荧光钙成像系统观察胞内游离钙离子的变化,采用MTT染色法检测神经元的损伤程度。结果:BK诱导可迅速升高原代培养大鼠皮质细胞内的钙离子水平。DS干预可部分逆转BK对胞内钙离子升高的影响(P<0.05)。MTT结果显示,BK组神经元存活率明显低于对照组(P<0.05);DS低、中、高剂量组的存活率均高于BK组(P<0.05)。结论:DS可拮抗缓激肽诱导的细胞内钙升高,对胞内钙紊乱所致的神经细胞损伤具有一定保护作用。
引文
[1]Imamura K,Sahara N,Kanaan NM,et al.Calcium dysregulation contributes to neurodegeneration in FTLD patient i PSC-derived neurons[J].Sci Rep,2016,6:34904.
[2]Agostini M,Fasolato C.When,where and how?Focus on neuronal calcium dysfunctions in Alzheimer's Disease[J].Cell Calcium,2016,60:289-298.
[3]Jalini S,Ye H,Tonkikh AA,et al.Raised Intracellular Calcium Contributes to Ischemia-Induced Depression of Evoked Synaptic Transmission[J].PLo S One,2016,11:e0148110.
[4]Kim TY,Yoshimoto T,Aoyama Y,et al.Analysis of the protective effects of a neuronal Cav2.1 calcium channel in braininjury[J].Neuroscience,2016,313:110-21.
[5]杜佐华,曾晚成,龚培力,等.蝙蝠苏林碱抗实验性心律失常作用[J].中药药理与临床,1996,12:21-23.
[6]龚培力,杜佐华,曾繁典.蝙蝠葛酚性碱的抗心律失常作用[J].中药新药与临床药理,1995,6:13-16.
[7]刘景根,李瑞,刘国卿,等.(-)-S R-蝙蝠葛苏林碱对谷氨酸引起的大鼠大脑皮质神经元损伤的保护作用[J].药理学报,1998,33:171-174.
[8]张涛,胡怀强,王旭辉,等.一种高效简便的原代神经元培养方法[J].神经损伤与功能重建,2016,11:471-472,475.
[9]Kanatsu Y,Chen NH,Mitoma J,et al.Gangliosides stimulate bradykinin B2 receptors to promote calmodulin kinase II-mediated neuronal differentiation[J].J Biochem,2012,152:63-72.
[10]Szteyn K,Gomez R,Berg KA,et al.Divergence in endothelin-1-and bradykinin-activated store-operated calcium entry in afferent sensory neurons[J].ASN Neuro,2015,7:pii:1759091415578714.