孔雀石绿单克隆抗体的制备及其鉴定

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• 作者：王权龚朋飞陈永军
• 会议时间：2010-03-20
• 关键词：孔雀石绿 ; 单克隆抗体 ; 酶联免疫吸附试验 ; 抗原免疫 ; 杂交瘤细胞
• 作者单位：中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室农业部动物寄生虫学重点实验室,上海 200232
• 母体文献：全国畜禽水产养殖污染监测与控制治理技术交流研讨会论文集
• 会议名称：全国畜禽水产养殖污染监测与控制治理技术交流研讨会
• 会议地点：杭州
• 主办单位：中国林牧渔业经济学会
• 语种：chi

摘要

用人工合成的无色孔雀石绿-兔血清白蛋白(LMG-RSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术筛选抗无色孔雀石绿的单抗,单抗经纯化后对其特异性和灵敏性进行了鉴定,探讨了建立孔雀石绿的免疫学检测方法。结果显示,经细胞融合和筛选得到了1株分泌抗无色孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞5E9。经鉴定,该杂交瘤细胞的染色体数为98.82±5.6,间接ELISA检测小鼠腹水的抗体效价达1.3×105,该细胞连续培养10代以上,生物学性状稳定,间接竞争ELISA(ciELISA)结果显示,无色孔雀石绿50[%]抑制的质量浓度为18.5 μg/L,除孔雀石绿外,与其他类似结构和相关类型的药物没有交叉反应,表明该单抗用于孔雀石绿的检测有较大的应用价值。