Analyse de la réponse des kératinocytes face à l’infection par les dermatophytes sur un modèle d’épiderme humain reconstruit

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• 作者：Emilie Faway¹ ; ; Ludivine Cambier² ; Bernard Mignon² ; Yves Poumay¹ ; Catherine Lambert de Rouvroit¹
• 关键词：Dermatophytose ; É ; piderme humain reconstruit ; Modè ; le d&rsquo ; infection
• 刊名：Annales de Dermatologie et de Vénéréologie
• 出版年：2016
• 出版时间：December 2016
• 年：2016
• 卷：143
• 期：12_supp_S
• 页码：S420
• 全文大小：131 K
• 卷排序：143

文摘

Les dermatophytoses sont des lésions superficielles des structures kératinisées de l’organisme, causées par des champignons kératinophiles et kératinolytiques appelés dermatophytes. Malgré une incidence globale de 20 %, les mécanismes d’infection mis en place par les dermatophytes, de même que la réponse de l’hôte face à ces agents pathogènes, sont encore peu connus. Un modèle d’infection par les arthrospores de l’espèce anthropophile Trichophyton rubrum, responsable de plus de 90 % des dermatophytoses chez l’homme, a été mis au point sur épiderme humain reconstruit (RHE). L’objectif de cette étude est de caractériser la réponse des kératinocytes face à l’infection par les dermatophytes dans ce modèle sur RHE.Matériel et méthodesLes RHE ont été produits à partir de kératinocytes primaires ensemencés à haute densité sur filtre polycarbonate. Après 11 jours de culture à l’interface air-liquide, les RHE ont été infectés par application topique de 1700 arthrospores de T. rubrum par cm2. Après 4 h d’incubation, des rinçages ont été effectués permettant d’éliminer les arthrospores non adhérentes et de réexposer les kératinocytes à l’interface air-liquide. Les épidermes infectés ont alors été maintenus dans un incubateur humidifié à 37 °C et 5 % de CO2 pendant plusieurs jours. L’expression des cytokines et des peptides antimicrobiens par les kératinocytes au cours de l’infection a été étudiée par RT-qPCR après extraction des ARN totaux des RHE infectés et rétro-transcription. La libération des cytokines dans le milieu de culture a été mesurée par tests Elisa.RésultatsLes cytokines pro-inflammatoires (IL-1α, TNFα, IL-8) ne sont pas détectées dans les milieux de culture des RHE dans les quatre premiers jours de l’infection. Par contre, l’expression des ARNm des cytokines (TSLP, IL-1α, IL-1β, TNFα, IL-6, IL-8) et des peptides antimicrobiens (β-défensine-2, β-défensine-3, Ribonucléase-7) par les kératinocytes augmente au quatrième jour suivant l’inoculation des RHE par les arthrospores de T. rubrum.DiscussionLes kératinocytes ne semblent réagir à l’infection de manière significative qu’à partir du quatrième jour suivant l’inoculation. Durant les trois premiers jours de l’infection, les éléments fongiques sont limités à la couche cornée de l’épiderme, avant d’entrer en contact avec les kératinocytes vivants à partir du quatrième jour. Il semble donc que les éléments fongiques présents dans la couche cornée ne sont pas détectés à ce stade par les cellules vivantes des couches inférieures. Dans les lésions de dermatophytose cutanées in vivo, la localisation initiale des dermatophytes dans la couche cornée pourrait dès lors représenter une protection des dermatophytes pour retarder l’activation du système immunitaire.ConclusionLe modèle d’épiderme humain reconstruit est un outil valide pour étudier les interactions hôte-pathogène dans le cadre de la dermatophytose.